基因轉殖魚

核心利用 Tol2-Gateway 系統建立基因轉殖魚模型。此技術結合了 Tol2 轉座子和 Gateway 重組技術，提供快速、模組化的基因轉殖方法。

Tol2-Gateway 系統簡介：
Tol2 是一種來自青鱂魚（Oryzias latipes）的轉座子，能夠在脊椎動物細胞中有效地在基因組中插入特定 DNA 片段。Gateway 技術則利用特定的重組酶，允許研究人員快速且準確地組裝多個 DNA 片段。結合這兩種技術，研究人員可以快速地構建包含啟動子、目標基因和標記基因的轉殖載體，並透過 Tol2 系統將其快速地插入至斑馬魚基因組中。
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技術流程：

1. 設計並構建包含目標基因的 Gateway 進入載體（Entry Vectors），例如 p5E（啟動子）、pME（編碼序列）和 p3E（3′ UTR）。
2. 透過 LR 重組反應，將上述進入載體與 Tol2 目的載體（Destination Vector）組合，形成最終的轉殖載體。
3. 將轉殖載體與 Tol2 轉座酶 mRNA 共同注射至一細胞期的斑馬魚胚胎。
4. 培育胚胎至適當階段，進行基因型分析以確認轉基因的表達。
5. 建立穩定的轉基因品系，用於後續研究。